З'являються бактерії або паразити яскраво-зеленувато-жовтий на темному тлі. Міколієві кислоти мікобактерій зберігають цю пляму при знебарвленні кислотним спиртом. Метод більш швидкий і чутливий, ніж методика ЗН.
Інтерпретація результатів Фарба Auramine O буде зв'язуватися з мікобактеріями, які виглядають як яскраві жовтувато-зелені стрижні, що світяться на темному тлі. Мікобактерії мають довжину приблизно від 1 до 10 мкм і зазвичай виглядають як тонкі палички. Однак вони також можуть виглядати вигнутими або зігнутими, коккобацилярними або ниткоподібними.
І зовнішня, і внутрішня стінки ооцист Cryptosporia, а також внутрішні структури забарвлюються барвником аурамін O; фенольний компонент прискорює проникнення крізь стінки ооцист. Флуоресценція зберігається в клітинній стінці після знебарвлення.
Родамін аурамінове фарбування використовується для виявлення мікобактерій безпосередньо з клінічних зразків. Барвник зв'язується з міколевими кислотами і флуоресціює під ультрафіолетом. Кислотостійкі організми (мікобактерії) будуть виглядати жовтими або помаранчевими під ультрафіолетовим світлом.
4.1 Принцип Первинне фарбування (аурамін) зв'язує міколові кислоти клітинної стінки. Інтенсивне знебарвлення (сильні кислоти, спирт) не звільняє первинне фарбування клітинної стінки, і мікобактерії зберігають флуоресцентний яскраво-жовтий колір аураміну.